T-2毒素免疫親和柱是一種用于檢測和凈化T-2毒素的實驗室工具。它通過抗原抗體反應(yīng),將樣品中的T-2毒素與連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上的單克隆抗體結(jié)合,從而有效地從樣品中分離出T-2毒素。
1.樣品準備:
樣品需經(jīng)過適當?shù)奶崛?、過濾和稀釋處理。
取樣量應(yīng)根據(jù)需要適當調(diào)整,并注意提取液量的相應(yīng)改變。
當樣本中待檢毒素的含量除以稀釋倍數(shù)高于柱容量時,需要適當降低上樣液的體積,重新檢測。
2.操作步驟:
使用前,免疫親和柱需回至室溫(22~25℃)。
將樣品提取液緩慢通過毒素免疫親和柱,使T-2毒素與抗體結(jié)合。
洗滌免疫親和柱以除去未被結(jié)合的雜質(zhì)。
最后采用甲醇洗脫T-2毒素,然后進行相關(guān)分析。
3.設(shè)備與耗材:
需要配合HPLC、LC-MS等分析儀器使用。
其他必要的設(shè)備和耗材包括高速均質(zhì)器、量筒、移液器或移液管、均質(zhì)杯、樣品瓶、快速定性濾紙、微纖維濾紙等。
4.注意事項:
上樣溶液pH需在6~8之間,若偏離此范圍需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
上機檢測時的溶劑與流動相保持一致可以消除溶劑效應(yīng)的影響。
T-2毒素具有細胞毒性,應(yīng)戴手套口罩等防護工具操作。
使用過的容器及T-2毒素溶液最好用次氯酸鈉溶液(5%V/V)浸泡過夜。
T-2毒素免疫親和柱保存要求:
1.溫度控制:
免疫親和柱應(yīng)儲存在2~8℃的環(huán)境中。
不得凍存,因為凍存可能會影響其性能。
2.有效期管理:
注意檢查產(chǎn)品的有效期,不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
不同品牌的產(chǎn)品有效期可能有所不同,如某些產(chǎn)品性能穩(wěn)定,4℃保存有效期長達2年;而另一些產(chǎn)品則可能只有12個月的有效期。具體有效期請參考產(chǎn)品包裝盒上的說明。
3.環(huán)境條件:
除了溫度控制外,還應(yīng)確保存儲環(huán)境干燥、避光,以保持產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
